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                  新冠核酸檢(jian)測PCR建設要點

核酸檢(jian)測中(zhong)，應該(gai)如何{建設一個標準的PCR實驗室}PCR實驗室如何設計規劃才堪稱專業？PCR實驗室管理又有哪些注意要點？

PCR實驗室(shi)分(fen)為六個(ge)區域(yu)，分(fen)別為(wei)：

1.更換防護服區域

2試劑配制區；

3.樣品處理區；

4.核(he)酸擴增區；

5.產物分析區

6.消毒滅(mie)菌區

傳(chuan)統PCR為四個區域，為配合新冠核酸檢測沃霖實驗室建議增設兩個區域，一個區域為前段更換防護服，一個區域為 消毒滅菌室區。

一、PCR實驗室設計規劃

如(ru)使用全(quan)自動分析儀，區域可適當合并。

沃霖實驗建議：進入各(ge)工(gong)(gong)(gong)作(zuo)區域必(bi)須嚴格按照單一方(fang)向進行，不同(tong)的工(gong)(gong)(gong)作(zuo)區域使用不同(tong)的工(gong)(gong)(gong)作(zuo)服，例(li)如(ru)不同(tong)的顏色(se)。工(gong)(gong)(gong)作(zuo)人員離開各(ge)工(gong)(gong)(gong)作(zuo)區域時，不得將工(gong)(gong)(gong)作(zuo)服帶(dai)出

二(er)、PCR實驗室平面布局

試劑準備區：擴增試劑的(de)配制、分裝和保存(cun)。

樣(yang)(yang)品處(chu)理區(qu)：樣(yang)(yang)品登記、分裝；核酸提取、保(bao)存(cun)和加樣(yang)(yang)。

擴(kuo)增產物分(fen)析區：擴(kuo)增產物的測定、結(jie)果(guo)分(fen)析、登記(ji)及報告(gao)

擴(kuo)增前區與擴(kuo)增后(hou)區應嚴格(ge)分(fen)開(kai)，須使用不同(tong)的房間，兩區之間好有(you)一定的間隔。

使用商品化試劑盒可在樣品處理區進行少量試劑配制。

在滿足下(xia)(xia)列操作和(he)清潔處(chu)理(li)要求(qiu)的前提下(xia)(xia)樣品處(chu)理(li)區和(he)試劑準備區可設在同一房(fang)間內(nei)：

在(zai)生物安(an)全(quan)柜(ju)內(nei)操作；

每個實驗(yan)人員、實驗(yan)組分(fen)別使用各自的試劑及耗材；

盛(sheng)放(fang)污染材料的(de)器皿(min)密(mi)封并(bing)一次性(xing)使用(yong)；

用有效的方(fang)法對操作區域和共享器具在實驗前后進行清潔及消(xiao)毒(du)。

三、PCR實驗室建設規劃介紹

1、主(zhu)體(ti)結構：

主體為(wei)彩鋼(gang)板、鋁合金型材。室內所有(you)陰角、陽角均采用鋁合金50內圓角鋁，從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問題。結構牢固，線條簡明，美觀大方，密封性好。

2、標準的(de)三區分隔(ge)和氣壓調節(jie)：

將PCR過程分成試劑準備、標本制備和PCR擴增檢測三個獨立的實驗區。整個區域有一個整體緩沖走廊。每個獨立實驗區設置有緩沖區，同時各區通過氣壓調節，使整個PCR實驗過程中試劑和標本免受氣溶膠的污染并降低擴增產物對人員和環境的污染。

可打開(kai)緩沖區Ⅰ，緩沖區Ⅱ和PCR擴增區的排風扇往外排氣，在實驗區的外墻上和各扇門上都安裝有風量可調的回風口，空氣通過回風口向室內換氣。

3、消毒：

在三個(ge)實驗區和(he)三個(ge)緩(huan)沖區頂部以及傳送窗內部安裝有紫外(wai)燈，供消毒(du)用。

在試劑(ji)準備區和標(biao)本制備區還(huan)設置移(yi)動紫外(wai)線燈(deng)，對實(shi)驗(yan)桌進(jin)行(xing)局部消(xiao)毒。

4、機械連鎖不銹(xiu)鋼傳(chuan)遞窗：

試(shi)劑和(he)標本通(tong)過(guo)機械(xie)連鎖不銹鋼(gang)（不建議使用電(dian)子連鎖方式）傳遞(di)窗傳遞(di)，保證試(shi)劑和(he)標本在傳遞(di)過(guo)程中不受污(wu)染（人物分流）

5、地面

地面(mian)建(jian)議使用PVC卷材地面或自流坪地面，整體性好。便于進行清掃，耐腐蝕。沒有條件的也可采用水磨石地面，或大塊的瓷磚（至少800mm×800mm）接縫需要小于2mm。

6、照明

燈具要選用凈(jing)化燈具，能達到便(bian)于清洗、不積塵的特(te)點。

在建設的過(guo)程中應(ying)注意

●規范(fan)的安裝流(liu)程和全面的服務流(liu)程。

●嚴格按照規(gui)范科(ke)學設計的安裝流程。

●安(an)(an)裝前需要確定以下安(an)(an)裝條(tiao)件，如(ru)：電(dian)源電(dian)壓(ya)，電(dian)源進(jin)(jin)線(xian)位(wei)置(zhi)，電(dian)話網絡線(xian)進(jin)(jin)線(xian)位(wei)置(zhi)，進(jin)(jin)水水壓(ya)，小安(an)(an)裝空間，地面平整度，通風(feng)孔、進(jin)(jin)水管(guan)和(he)下水管(guan)的位(wei)置(zhi)等，理想(xiang)狀態的空間尺寸和(he)通風(feng)口尺寸。

四、PCR實驗室設計要點

PCR實(shi)驗(yan)(yan)室可以是(shi)分(fen)散形(xing)式，也可以是(shi)組合形(xing)式。完成一(yi)組PCR實(shi)驗(yan)(yan)，通常應經過試劑(ji)配制(zhi)、樣品處理、核酸(suan)擴增及(ji)產物分(fen)析四個(ge)實(shi)驗(yan)(yan)過程，若(ruo)實(shi)驗(yan)(yan)工藝需要，還應增加樣品粉(fen)碎過程。

一、分散形式PCR實驗室

所謂分(fen)散形(xing)式PCR實驗室，是指完成上述實驗過程的實驗用房彼此相距較遠，呈分散布置形式。對于這種布置形式的PCR實驗室，由于各個實驗之間不易相互干擾，因此無需特殊條件要求。

二、組合(he)形式PCR實驗室

所謂組合形式PCR實驗室,是指完成PCR四個實驗過程的實驗用房相鄰布置，組成獨立實驗區域的形式。對于組合形式PCR實驗室，由于各個實驗間集中布置，容易造成相互干擾，因此，對總體布局以及屏障系統具有一定的要求。各室在入口處設緩沖間，以減少室內外空氣交換。

PCR實(shi)驗室建設(she)一(yi)些經驗分享(xiang)：

試劑配制室(shi)及樣品處理室(shi)宜呈微正壓，以防外界含核(he)酸氣溶(rong)膠的空氣進入(ru)，造成污染；

可以通過控制進風(feng)風(feng)量大(da)于排(pai)風(feng)風(feng)量達(da)到正壓效果。

核(he)酸擴增室及產物分析(xi)室應呈微負壓(ya)(ya)，以(yi)防含核(he)酸的(de)氣(qi)溶(rong)膠擴散(san)出去污染(ran)試劑與(yu)樣品(pin)，可以(yi)通(tong)過控制排(pai)風(feng)(feng)風(feng)(feng)量(liang)大于進風(feng)(feng)風(feng)(feng)量(liang)達到(dao)負壓(ya)(ya)效果。

在(zai)理想情況下，PCR實驗室緩沖間內，可設置正壓，使室內空氣不流向室外，室外空氣不流向室內。PCR實驗室進風由原有中央空調控制，要求將中央空調風口安裝到指定定點，且高度為地面鋪裝好后2600mm處。

如果(guo)使用熒(ying)光PCR儀，擴增室和產物分析室可以合并。

若房間進深允許(xu)，可(ke)設PCR內部專用走廊。需要指出的是在減少室內外空氣交換方面，緩沖間比專用走廊更有意義。

各(ge)個(ge)區域之間應具備單向的(de)實(shi)驗(yan)工藝(yi)流、物流、人(ren)流與氣流，形成單向流程的(de)保(bao)護屏(ping)障，避免實(shi)驗(yan)之間的(de)相互干擾(rao)，防止核酸氣溶膠對實(shi)驗(yan)過程造成污(wu)染(ran)產生假(jia)性結果。